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酶联免疫分析实验外包

更新时间:2020-08-04

访问次数:34

简要描述:

酶联免疫分析实验外包是基尔顿生物的重要外包服务之一。酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。

酶联免疫分析实验外包服务由专业的科研人员完成,实验操作严谨负责,结果真实可靠。

酶联免疫分析实验外包服务内容:

实验过程

(1)标准品的稀释与加样:标准品按照说明书稀释好五个梯度,各个梯度每孔加样量都为50μL;

(2)加样:分别设空白孔、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μL,然后再加待测样品10μL。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀;

(3)温育:用封板膜封板后置37℃温育30min;

(4)配液洗涤:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用;小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30sec后弃去,如此重复5次,拍干;

(5)加酶:每孔加入酶标试剂50μL,空白孔除外;

(6)温育:用封板膜封板后置37℃温育30min;

(7)洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30sec后弃去,如此重复5次,拍干;

(8)显色:每孔先加入显色剂A50μL,再加入显色剂B50μL,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15min;

(9)终止:每孔加终止液50μL,终止反应;

(10)测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15min以内进行。

计算

以标准物的浓度为纵坐标,OD值为横坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

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