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活死细胞染色实验

更新时间:2020-08-20

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简要描述:

活死细胞染色实验时基尔顿生物的基础服务项目之一,由经验丰富的实验技术人员操作完成。

Calcein-AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,Calcein-AM由于在Calcein的基础上加强了疏水性,因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后,酯酶会将其水解为Calcein 留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCBCF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate)相比,Calcein-AM适合作为荧光探针去染活细胞的,因为它的细胞毒性很低。Calcein 的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm. Calcein -AM仅对活细胞染色。作为核染色染料的PI不能穿过活细胞的细胞膜,它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(激发: 488, 545nm, 发射: 617 nm), 因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein-DNA和PI-DNA都可被490nm激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm激发,仅可观察到死细胞。根据以上特点,Calcein, AM和PI经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。

 

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