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骨髓间充质干细胞原代培养实验

简要描述:

骨髓间充质干细胞原代培养实验是基尔顿生物的基础服务项目之一,由专业的实验人员操作完成。

更新时间:2020-09-16

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大鼠骨髓间充质干细胞是干细胞研究的主要种子细胞之一。 它能够成骨、 成脂和成软分化,并具有很强的增殖能力。研究中使用的大鼠骨髓间充质干细胞的来源主要是购买商品化细胞系或者从大鼠股骨和胫骨中提取。
目前,提取大鼠骨髓间充质干细胞的主要方法是全骨髓贴壁法。该方法主要利用骨髓间充质干细胞易贴壁的特性将其与其他血细胞分离开来。主要步骤是将大鼠股骨和胫骨骨髓抽吸出来,然后使用注射器和含有10%胎牛血清的DMEM培养基吹打骨髓组织形成单细胞悬液,再用200目滤网过滤掉剩余组织块, 1200rpm离心5分钟,弃上清,使用5ml含有10%胎牛血清的DMEM培养基重悬细胞沉淀,后将单细胞悬液放入无菌培养瓶中培养, 48小时后换液。该访法步骤繁琐,过滤步骤和离心步骤增加了污染的几率和细胞的损耗量。离心后大量红细胞和干细胞混杂在一起,影响了干细胞的贴壁,导致原代细胞中干细胞比例较低,培养基营养损耗。

 

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