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细胞凋亡检测服务

更新时间:2021-01-22

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简要描述:

细胞凋亡检测服务是基尔顿生物的基础服务项目之一,由细胞平台经验丰富的实验人员操作完成。

 细胞凋亡(Cell Apoptosis)是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用。    

      细胞凋亡检测常用的方法为AnnexinV/PI双染法流式检测。其原理为:正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜内侧,但在细胞凋亡早期, PS从细胞膜内侧翻向外侧至膜表面。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,可以与磷脂酰丝氨酸特异性结合,将Annexin V进行荧光素(FITC)标记作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞早期凋亡的发生。碘化丙啶(propidine iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,无法进入活细胞内部,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI 能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此将Annexin V 与PI 匹配使用,就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。

细胞凋亡过程中染色体DNA发生断裂,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)利用脱氧核糖核苷酸末端转移酶(tdt)的作用将断裂缺口产生的DNA3'-oh与生物素相连接,使断裂DNA染色,从而分析凋亡细胞。

 

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