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细胞染色实验

简要描述:

细胞染色实验
细胞染色实验服务是基尔顿生物的基础服务项目之一,由细胞平台经验丰富的实验人员操作完成。

更新时间:2021-03-18

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Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色.Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258两种hoechsts33258, hoechst33342二者区别不大,但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些,所以-般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色,而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色!
PI (Propidium Iodide 碘化丙啶)染色:是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测.碘化丙啶(Propidium Iodide, PD是- -种核酸染料(红色),它不能透过完整的细胞膜,但调亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红.用PI单一染色观测培养细胞, 只能表示细胞的坏死情况,而不是凋亡( 当然晚期凋亡PI亦可着色)。但是如果您只是想知道细胞的死亡情况,而不是仔细区分坏死或凋亡,那么PI单一染色也可以。但是如果您一定要认定细胞的调亡,那么PI单一染色显然不够!
annexin-V染色细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V,PS)外翻,Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合.这样,Annexin-v染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态.Annexin-V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。Annexin V用FITC标记发绿色荧光;如果用PE标记就发红色荧光。

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